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  1. 2011.06.17 Indol 형성검사
STUDY/V.M 본1-12011. 6. 17. 16:04
Indol 형성검사

1.Indole은 세균에 의해서 tryptophan이 가수분해 되어 생겨나는 질소 함유 화합물이다.  Indole은 몇 종류의 세균에 의해서만 생산되고 생성된 Indole은 화학적으로 쉽게 증명될 수 있기 때문에 균의 동정에 유용하게 이용된다.

2. 준비물
영양 액체배지에 18시간 배양한 Bacillus subtilis, Escherichia coli, Salmonella paratyphi A
tryptophan(peptone도 가능) 액체배지(3개)
Kovac시약=HCl+p-dimethylaminobenzaldehyde+alchol(ethyl- or isoamyl- or amyl- or butyl-)

3. 순서
①각 배지에 Bacillus subtilis, Escherichia coli, S.paratyphi A를 각각 접종한 후 접종한 균 이름과 날짜를 기록한다.
②모든 배지는 37℃에서 18시간 배양한다.
③배양 후 kovac 시약을 각 배지에 2~3방울 떨어뜨리고 잘 혼합한 후 세워두면 양성일 경우 알코올층이 붉게 변한다.

4. 해석
Bacillus subtilis의 배지 위에는  붉은ring이 나타난 것을 보아 양성이고 Bacillus subtilis는 tryptophan을 이용하여 Indole metabolite를 만들어 냈음을 알 수 있다.
가끔 orange color가 나타날 때가 있는데 이 때는 인돌 형성과정의 전구체인 skatole때문이다.

5. 원리
트립토판은 특정 박테리아에 의해 3가지의 인돌 대사물(인돌, skatole, indoleacetic acid)로 산화되는 아미노산이다.

인돌+p-dimethylaminobenzaldehyde→red-violet color(위에 ring으로뜸)

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Posted by XDii